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ELISA檢測(cè)試劑盒顯色淡,靈敏度偏低是什么原因

更新時(shí)間:2021-07-28      瀏覽次數(shù):1991


仁捷生物ELISA檢測(cè)試劑盒顯色淡,靈敏度偏低是什么原因,小編幫您找一下原因:
以下幾點(diǎn),請(qǐng)注意看哦

問題

序號(hào)

可能原因

解決方法

顯色淡,靈敏度偏低

1

 試劑盒未充分平衡

試劑盒從2~8℃冰箱取出后打開盒蓋,于室溫平衡至少20分鐘,確保所有試劑已平衡至室溫(約25℃)

2

 樣品不適合做ELISA檢測(cè)

樣品一般選擇培養(yǎng)上清、血清、血漿。其他樣品形式可能不適合做ELISA檢測(cè)或者需要優(yōu)化檢測(cè)的條件(例如稀釋液的成分)

3

 酶標(biāo)板在貯存或洗后拍干時(shí)過分干燥

防止板過于干燥

4

 包被抗體遭到破壞

操作溫和,移液槍不能碰到孔底

5

 樣本和抗體孵育條件不合適

按照說明書條件,建議孵育過程中全程振蕩孵育。

6

 洗滌浸泡時(shí)間過長(zhǎng)

按照說明書操作。勿人為增加浸泡時(shí)間;

7

 偶聯(lián)HRP試劑污染

棄去試劑,重新配置

8

 錯(cuò)誤的稀釋偶聯(lián)HRP試劑

棄去試劑,重新配置

9

 TMB底物孵育時(shí)間過短,因非人為因素影響,需要優(yōu)化孵育時(shí)間

確定合適的孵育時(shí)間:人為判定-最高濃度的標(biāo)準(zhǔn)品出現(xiàn)深藍(lán)色;S4-5有淡藍(lán)色;機(jī)器判定620 nm波長(zhǎng)下測(cè)定OD值達(dá)到0.6-0.65

10

 樣本濃度過高或存在基質(zhì)效應(yīng)

建議做不同稀釋倍數(shù),確認(rèn)樣本最佳稀釋倍數(shù)。

11

 酶標(biāo)儀濾光片設(shè)置有問題或者波長(zhǎng)選擇不對(duì)

確認(rèn)儀器設(shè)置及選擇正確的波長(zhǎng)檢測(cè)。

12

 酶標(biāo)板不適合做ELISA

不能使用細(xì)胞培養(yǎng)板,建議使用ELISA專用高吸附力板子。


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